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Title in Portuguese: Caracterização da ação vasodilatadora do extrato aquoso obtido de folhas Alpinia zerumbet K.SCHUM em aorta de ratos
Title: Characterization of vasorelaxant effects of aqueous extract obtained from leaves of Alpinia zerumbet K. SCHUM in rat aorta
Author: Rocha, Hidemburgo Gonçalves
Advisor(s): Moraes Filho , Manoel Odorico de
Keywords: Alpinia
Óxido Nítrico
Endotélio
Issue Date: 14-Apr-2012
Citation: ROCHA, H. G. Caracterização da ação vasodilatadora do extrato aquoso obtido de folhas Alpinia zerumbet K.SCHUM em aorta de ratos. 2012. 94 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015.
Abstract in Portuguese: A Alpinia zerumbet é uma planta comumente encontrada na região do nordeste do Brasil. Essa planta é conhecida popularmente por colônia e é muito utilizada na medicina popular por suas propriedades diuréticas e anti-hipertensivas. O objetivo do presente estudo foi investigar se o extrato aquoso das folhas de A. zerumbet (EAAz) apresentava atividade vasodilatadora em aorta de rato pré-contraída com fenilefrina e, elucidar o seu mecanismo de ação. Ratos machos Wistar (250 a 300 g), provenientes do biotério da UFC, foram sacrificados por deslocamento cervical e a aorta torácica removida e dissecada. Os anéis da aorta (4 a 5 mm) foram montados em câmeras orgânicas, contendo solução de Krebs e aerados com carbogênio a 37°C, para as medidas de variações na tensão isométrica. O endotélio dos anéis da aorta foi removido mecanicamente para estudar o seu envolvimento no efeito vasodilatador do EAAz. Para estudar o envolvimento do óxido nítrico (NO), GMPc, prostanóides, canais de potássio ativados por Ca2+, espécies reativas do oxigênio e a ativação das enzimas quinases Src e PI3 quinase, as preparações foram tratadas, respectivamente, com L-NAME (100 µM), ODQ (10 µM), indometacina (10 µM), caribdotoxina (100 nM) mais apamina (100 nM), MnTMPyP (100 µM), catalase (500 U/ml), PEG-catalase (500 U/ml), SOD (500 U/ml) e PP2 (20 µM), Wortmannin (300 nM). O efeito vasodilatador do EAAz (0,05; 0,15; 0,5; 1,5; 15 e 50 µg/mL), acetilcolina (10-8 - 10-5 M) e nitroprussiato de sódio (10-8 M) foram avaliados em aorta de ratos pré-contraída com fenilefrina (10-8 - 3x10-8 M), antes e após tratamento com os inibidores específicos. A vasodilatação induzida pelo EAAz mostrou-se dependente do endotélio e mediada pelo NO via GMPc já que o relaxamento vascular foi abolido na presença do éster metílico de NG-nitro-l-arginina e do ODQ. A vasodilatação também foi reduzida pelo MnTMPyP (permeante celular mimético da SOD), polietilenoglicol catalase, PP2 (inibidor da quinase Src) e Wortmannin (inibidor da fosfoinositideo 3-quinases). A via de produção de EROs induzida pelo EAAz foi inibida significativamente pela ação do MnTMPyP e PEG-catalase. Ocorreu também a inibição da via EROs/PI3 quinase/Src quinase que estão envolvidas na ativação da eNOS. O EAAz causou um relaxamento dependente do endotélio via NO/GMPc com o possível envolvimento de EROs e das Src quinase e fosfoinositideo 3-quinase dependente de Akt. Dessa forma, pode-se concluir que o relaxamento vascular induzido pelo EAAz poderia explicar o tradicional uso do chá das folhas de A. zerumbet para o tratamento da hipertensão arterial.
Abstract: The Alpinia zerumbet is a plant commonly found in the northeastern region of Brazil. This plant is popularly known as colony and is widely used in folk medicine for its diuretic and antihypertensive properties. The aim of this study was to investigate whether the aqueous extract of leaves of A. zerumbet (EAAz) had vasodilator activity in rat aorta pre-contracted with phenylephrine and to elucidate its mechanism of action. Male Wistar rats (250-300 g) from the vivarium of UFC, were killed by cervical dislocation and the thoracic aorta removed and dissected. The aortic rings (4-5 mm) were mounted in organ cameras, and containing Krebs solution aerated with carbogen at 37 ° C to measure changes in isometric tension. The endothelium of the aortic rings was removed mechanically to study their involvement in the vasodilator effect of EAAz. To study the involvement of nitric oxide (NO), cGMP, prostanoid, potassium channels activated by Ca2+, reactive oxygen species and activation of enzymes kinases Src and PI3 kinase, the preparations were treated respectively with L-NAME (100 µM ), ODQ (10 µM), indomethacin (10 µM), carybdotoxin (100 nM) plus apamin (100 nM), MnTMPyP (100 µM), catalase (500 U / ml), PEG-catalase (500 U/ ml), SOD (500 U / ml) and PP2 (20 µM), wortmannin (300 nM). The vasodilatory effect of EAAz (0.05, 0.15, 0.5, 1.5, 15 and 50 µg / mL), acetylcholine (10-8 - 10-5 M) and sodium nitroprusside (10-8 M ) were evaluated in the aorta of rats pre-contracted with phenylephrine (10-8 - 3x10-8 M) before and after treatment with the specific inhibitors. EAAz induced vasodilation was dependent and endothelium mediated by NO via cGMP as the vascular relaxation was abolished in the presence of the methyl ester of NG-nitro-L-arginine and ODQ. Vasodilation was also reduced by MnTMPyP (mimetic cellular permeant SOD), catalase polyethylene glycol, PP2 (Src kinase inhibitor) and wortmannin (inhibitor of phosphoinositide 3-kinase). The route of production of ROS induced EAAz was significantly prevented by the action of MnTMPyP and PEG-catalase. There was also the inhibition of the kinase ROS/PI3 / Src kinase that are involved in the activation of the eNOS. The EAAz caused an endothelium-dependent relaxation via NO / cGMP with the possible involvement of ROS and Src kinase and phosphoinositide 3-kinase-dependent Akt. Taking us to the conclusion that the vascular relaxation induced by EAAz could explain the traditional use of the tea leaves of A. zerumbet for the treatment of hypertension.
URI: http://www.repositorio.ufc.br/handle/riufc/13783
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