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Title in Portuguese: O papel de biofilmes microbianos na osteoquimionecrose do osso mandibular induzida por ácido zoledrônico
Author: Coelho, Camila Carvalho de Oliveira
Advisor(s): Alves, Ana Paula Negreiros Nunes
Keywords: Osteonecrose da Arcada Osseodentária Associada a Difosfonatos
Bactérias
Vida Livre de Germes
Issue Date: 29-Apr-2019
Citation: COELHO, C. C. O. O papel de biofilmes microbianos na osteoquimionecrose do osso mandibular induzida por ácido zoledrônico. 2019. 117 f. Tese (Doutorado em Odontologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2019.
Abstract in Portuguese: A Osteonecrose dos Maxilares induzida por Bisfosfonatos (OMB) não possui fisiopatologia definida, mas se acredita que a infecção local possa participar do seu desenvolvimento. O objetivo desse estudo foi avaliar o papel do micro-organismo na osteoquimionecrose do osso mandibular induzida por ácido zoledrônico (AZ). Para isso, camundongos C57BL/6 selvagens (SELV), Specific-Patogen-Free (SPF) e Convencionalizados (CONV), isto é, SPF inoculados com microbiota de animais SELV (n=6), foram submetidos às administrações de AZ (1 mg/kg, via intraperitoneal) por três semanas. Quatro semanas depois, realizou-se exodontia do segundo molar inferior esquerdo, seguida de nova administração de AZ, 7 dias após o procedimento cirúrgico. Outros animais, SELV, SPF e CONV (n=6), receberam solução salina via intraperitoneal (controles). Foram realizadas análises do ganho de massa corpórea semanalmente e hematológica no dia 0 e 70. Biofilmes orais foram colhidos dos animais nos dias 0 e 70 para análise citológica qualitativa. Após eutanásia (dia 70), mandíbulas e órgãos foram excisados. Com as mandíbulas, realizaram-se microtomografias para mensuração da área hipodensa sugestiva de necrose e, após descalcificação, lâminas histológicas (hematoxilinaeosina) para análise histomorfométrica do alvéolo pós-exodontia. Rim, fígado, baço e estômago foram analisados histopatologicamente para parâmetros de toxicidade. Análise citológica qualitativa revelou sucesso na convencionalização, com permanência de microbiota semelhante aos animais SELV do dia 0 ao 70. O grupo SPF-AZ, que exibiu cocos no dia 0, passou a evidenciar bactérias filamentosas ao final do experimento. Maior área hipodensa foi vista nos alvéolos pós-exodontia de animais tratados com AZ em relação aos grupos tratados com salina. Histomorfometricamente, grupos SELV-AZ e CONV-AZ exibiram maior número de células inflamatórias e osteoclastos totais nos sítios pós-exodontia, comparados aos tratados com salina, além de colônias bacterianas e sequestros ósseos mais frequentes. O número de osteoclastos apoptóticos foi maior nos animais tratados com AZ, independente do grupo. A administração de AZ esteve associada à provável ocorrência de eventos anêmicos, tendência à redução no número de plaquetas e à vacuolização de epitélio tubular no rim. Animais livres de patógenos específicos exibiram retardo no ganho de massa corpórea. Assim, a presença de uma microbiota oral patogênica esteve relacionada à ocorrência de lesões de OMB em camundongos SELV e CONV, enquanto sua ausência revelou, somente, atraso cicatricial temporal sem sinais clássicos de lesão necrótica.
Abstract: Bisphosphonates-Related Osteonecrosis of Jaw (BRONJ) has no defined pathophysiology, but it is believed that local infection may participates of it development. The aim of this study was to evaluate the role of microorganism in osteochemonecrosis of jaw induced by zoledronic acid (ZA). For this purpose, C57BL/6 wild type mice (WT), specific-pathogen-free (SPF) and conventionalized (CONV), that are SPF animals inoculated with microbiota from WT animals (n = 6) were subjected to ZA adminstrations (1 mg/kg, intraperitoneally) for three weeks. Four weeks later, second lower left molar was extracted, followed by a new administration ZA realized seven days after surgery. Other animals, WT, SPF and CONV (n = 6) received saline solution intraperitoneally (controls). Body weight gain was performed weekly and haematological analyzes on day 0 and 70. Oral biofilms were collected from animals on days 0 and 70 for qualitative cytological analysis. After euthanasia (day 70), jaws and organs were excised. With the jaws, microtomographies was made to measure suggestive hypodense area of necrosis and, after decalcification, histologic slides (hematoxylin-eosin) for histomorphometric analysis of the post-exodontia alveolus. Kidney, liver, spleen and stomach were analyzed histopathologically for toxicity parameters. Qualitative cytological analysis revealed success in the conventionalization, with permanence of the similar microbiota to the WT animals from day 0 to 70. The SPF-ZA group, which exhibited cocci on day 0, showed filamentous bacteria at the end of the experiment. Greater hypodense area was seen in the post-exodontia alveoli of ZA-treated animals compared to saline groups. Histomorphometrically, WT-ZA and CONVZA groups exhibited a greater number of inflammatory cells and total osteoclasts in the postextraction sites, compared to those treated with saline, in addition to more frequent bacterial colonies and bone sequestra. The administration of ZA was associated with the probable occurrence of anemic events, a tendency of reduction in the number of platelets and the vacuolization of tubular epithelium in the kidney. SPF animals exhibited delay in body weight gain. Thus, the presence of a pathogenic oral microbiota was related to the occurrence of BRONJ lesions in WT and CONV mice, while their absence revealed, only, temporal cicatricial delay, without classic signs of necrotic lesion.
URI: http://www.repositorio.ufc.br/handle/riufc/46038
metadata.dc.type: Tese
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